期刊简介
刊名：中药药理与临床
Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica
主办：中国药理学会
四川省中医药科学院
刊期：月刊
出版地：四川省成都市
语种：中文
ISSN：1001-859X
CN：51-1188/R
创刊时间：1985年
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理中汤干预MAPK通路治疗脾胃虚寒型胃溃疡大鼠的机制研究
仇婧玥;喻昶;熊萌;任保平;仲美琪;周顺华;王晓娟;高晴;曾梅艳;宋厚盼;目的:基于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路探讨理中汤治疗脾胃虚寒型胃溃疡(GU)模型大鼠的药效作用及分子机制。方法:将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、艾司奥美拉唑4 mg/kg组、理中汤3.75、7.5 g/kg组。在15 d内，采用“苦寒泻下+饮食失节+劳倦过度+吲哚美辛”法构建GU脾胃虚寒证大鼠模型。观察大鼠整体状态及鼻唇、舌象、爪趾色泽改变；观测大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)和溃疡抑制率(CI);HE染色法观察大鼠胃黏膜病理改变并评分；ELISA法测定大鼠血清中白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量和胃组织中胃蛋白酶活性；微滴式数字PCR法和免疫荧光法检测大鼠胃组织中MAPK通路关键信号分子丝裂原活化蛋白激酶15(MAPK15)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)、基质金属蛋白酶3(MMP3)与半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3(CASP3)基因及蛋白表达。结果:理中汤可有效改善GU脾胃虚寒证大鼠胃黏膜损伤。相较于正常大鼠，模型大鼠胃黏膜溃疡指数显著升高(P<0.01),胃黏膜上皮细胞严重水肿、脱落，可见大量炎性细胞浸润(P<0.01);血清中IL-17、TNF-α、MDA含量及胃蛋白酶活力显著升高(P<0.01),GSH含量显著下降(P<0.01),胃组织Mapk15、P38 Mapk与Mmp3基因、蛋白表达显著上调(P<0.01),Casp3基因、蛋白表达下调(P<0.01);与模型对照组比较，理中汤各组大鼠胃黏膜溃疡指数明显降低(P<0.05),理中汤7.5 g/kg组CI达86.95%;镜下病理评分明显下降(P<0.05);血清IL-17、TNF-α、MDA含量和胃蛋白酶活力显著降低(P<0.01),GSH含量显著升高(P<0.01);胃组织Mapk15、P38 Mapk与Mmp3基因、蛋白表达显著下调(P<0.01);Casp3基因、蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:理中汤对GU脾胃虚寒证大鼠疗效显著，可促进溃疡愈合，其干预机制可能与调控MAPK信号通路，抑制氧化应激，消除炎症，促进胃黏膜修复有关。
加减补阳还五汤通过激活自噬促进Nrf2核转移改善糖尿病肾病足细胞损伤
杨帆;张晓云;娄菲菲;马赟;黄家安;刘利飞;赵炳武;王月华;目的:探讨加减补阳还五汤是否通过激活自噬促进核因子E2相关因子2(Nrf2)核转移改善糖尿病肾病(DKD)小鼠足细胞损伤。方法:选取11～12周龄的db/db小鼠24只，经适应性喂养1 w并检测尿蛋白阳性后，随机分为模型对照组、加减补阳还五汤16 g/kg组、雷帕霉素-海藻糖2 mg/kg组，设db/m组小鼠作为正常对照组，每组8只，连续给药8 w。检测小鼠血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、肾损伤分子-1(KIM-1)、尿微量白蛋白(mALB)含量或活力；HE染色观察肾脏的病理形态学；qRT-PCR法检测肾组织Wilms肿瘤基因(Wt1)、nephrin、podocin mRNA表达；Western blot法检测小鼠肾组织P62/SQSTM1抗体、Beclin1抗体、微管相关蛋白1轻链3-II抗体(LC3-II)、溶酶体相关膜蛋白1抗体(LAMP1)、Nrf2、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、醌氧化还原酶1(NQO-1)、血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白表达；免疫荧光观察Nrf2核转移变化。结果:与正常对照组比较，模型对照组小鼠肾组织出现病理损伤，血清FBG、TC、TG、MDA、BUN、Scr、KIM-1及mALB含量显著升高，SOD、GSH-PX活力显著降低(P<0.01),肾组织P62表达升高，LC3-II、beclin1、LAMP1表达下调(P<0.01),Wt1、Nephrin、Podocin mRNA表达下调(P<0.01),肾组织Keap1蛋白表达上调，NQO-1、HO-1、总Nrf2、核Nrf2蛋白表达下调(P<0.01);与模型对照组比较，经加减补阳还五汤干预后，DKD小鼠肾脏病理损伤显著改善(P<0.01),血清TC、TG、MDA、BUN、Scr、KIM-1及mALB含量显著降低，SOD、GSH-PX活力升高(P<0.01),肾组织P62蛋白表达下调，LC3-II、Beclin1、LAMP1蛋白表达上调(P<0.01),Wt1、Nephrin、Podocin mRNA表达上调(P<0.01),肾组织Keap1蛋白表达下调，NQO-1、HO-1、总Nrf2、核Nrf2蛋白表达上调(P<0.01)。结论:加减补阳还五汤可能通过激活DKD小鼠肾脏细胞自噬，疏通自噬通路，促进Nrf2核转移，抑制氧化应激，保护足细胞，降低尿蛋白排泄，改善DKD肾脏损伤。
当归补血汤通过AMPK/mTOR通路改善人肾足细胞自噬的机制研究
王楠;张紫薇;周静;卞勇;薛梅;目的:探讨当归补血汤通过单磷酸腺苷激活的蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)通路调控人肾足细胞自噬的机制。方法:人肾足细胞分为空白对照组、模型对照组、高糖+正常对照血清组、高糖+10%当归补血汤含药血清组。UPLC-PDA分析当归补血汤的主要成分；CCK-8法检测各组细胞的增殖情况；透射电镜法观察细胞的自噬改变；qRT-PCR法检测自噬相关因子mRNA的表达；采用Wertern blot法检测AMPK/mTOR通路及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达。结果:咖啡酸、阿魏酸、芒柄花黄素、毛蕊异黄酮和藁本内酯这五种当归补血汤主要成分同时被检出；当归补血汤含药血清能有效改善细胞活力，减少高糖条件下的人肾足细胞自噬小体、自噬溶酶体和隔离膜的数量；与正常对照血清组相比，当归补血汤含药血清组能够促进高糖条件下自噬相关因子Beclin1、Ulk 1、Lc3-Ⅱ/Lc3-Ⅰ、Ampk的mRNA表达，下调P62的mRNA表达(P<0.05),能够上调p-AMPK/AMPK和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达上调，下调p-mTOR/mTOR蛋白的表达(P<0.05)。结论:当归补血汤对高糖条件下人肾足细胞具有保护作用，机制是通过AMPK/mTOR信号通路激活下游细胞自噬而实现。
