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期刊简介

刊名:中药药理与临床
Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica
主办:中国药理学会

         四川省中医药科学院
刊期:月刊
出版地:四川省成都市
语种:中文
ISSN:1001-859X
CN:51-1188/R
创刊时间:1985年

 

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2026年03期
复方研究

六味地黄汤调控Integrin-β1/ILK/Snail通路抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞转分化改善肾纤维化的机制研究

孟斌;赵欣然;朱天煜;蒋志兵;谭夕雅;郭金晶;吴薇羽;唐群;

目的:探讨六味地黄汤(LWDHD)对单侧输尿管梗阻(UUO)诱导的肾纤维化大鼠肾组织中整合素β1(Integrin-β1)、整合素连接激酶(ILK)及EMT相关因子锌指转录因子(Snail)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响,研究其潜在抑制肾纤维化的作用。方法:选取48只SPF级雄性SD大鼠,复制UUO肾纤维化大鼠模型。随机分为假手术对照组、模型对照组、六味地黄汤3.38、6.75、13.5 g/kg组、依那普利10 mg/kg组。造模成功后,大鼠分别灌胃相应药物或生理盐水,持续2 w。于第2周末检测血清中的肌酐(Crea)、尿素氮(BUN)含量;采用HE染色和Masson染色观察肾组织变化及胶原纤维沉积情况;Western blot法、免疫组织化学染色法和RT-qPCR法分别检测肾组织Integrin-β1、ILK、Snail、α-SMA、Vimentin和E-cadherin的蛋白及mRNA表达。结果:与假手术对照组比较,模型对照组大鼠血清Crea和BUN含量明显升高(P<0.05),肾小管萎缩甚至消失,肾间质发生纤维化,同时见炎细胞浸润,胶原纤维沉积较为显著,肾组织中Integrin-β1、ILK、Snail、α-SMA、Vimentin蛋白表达和mRNA表达明显上调(P<0.05),E-cadherin蛋白表达和mRNA表达下调(P<0.05);与模型对照组比较,六味地黄汤各组大鼠血清Crea和BUN含量明显降低(P<0.05),肾脏病理状态和胶原纤维沉积不同程度改善,肾组织中Integrin-β1、ILK、Snail、α-SMA、Vimentin蛋白表达和mRNA表达均明显下调(P<0.05),E-cadherin蛋白表达和mRNA表达上调(P<0.05)。结论:六味地黄汤可以减轻UUO大鼠肾组织病理损伤,改善肾纤维化,其潜在作用机制可能与下调肾组织Integrin-β1/ILK/Snail信号通路表达,进而抑制肾小管上皮细胞转分化进程有关。

2026 年 03 期 v.42 ; 湖南中医药大学校级科研项目(编号:Z2023XJYB04); 湖南省自然科学基金项目(编号:2025JJ90041); 湖南省研究生科研创新项目(编号:CX20251206); 湖南省教育厅科学研究项目(编号:25C0209)
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基于UHPLC-MS/MS代谢组学探讨金匮肾气丸对慢性肾病肾间质纤维化的改善作用及其机制研究

李安;陈云贵;谢高宇;晋海军;梁建东;杨芳芳;蔡琨;刘琴;王丽颖;

目的:研究金匮肾气丸对慢性肾病肾间质纤维化的药效作用,并利用UHPLC-MS/MS代谢组学探讨其潜在作用机制。方法:SD大鼠随机分成正常对照组、模型对照组、氯沙坦5 mg/kg组及金匮肾气丸0.6、1.2、2.4 g/kg组,采用腺嘌呤200 mg/kg灌胃造模,造模3 w,给药7 w。取材前将大鼠置于代谢笼中收集24 h尿液;末次给药1 h后取材,检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)及尿中Crea含量,计算肌酐清除率(CCr);HE和Masson染色检测肾脏组织病理损伤;采用UHPLC-MS/MS检测血清内源性代谢物。结果:与正常对照组比较,模型对照组血清BUN、Crea含量显著升高(P<0.01),CCr显著降低(P<0.01);与模型对照组相比,金匮肾气丸各组血清BUN、Crea含量明显降低(P<0.05或P<0.01),CCr显著升高(P<0.01),腺嘌呤致肾小球萎缩,肾小管扩张,细胞排列稀疏,刷状缘消失,炎性细胞浸润及肾间质胶原纤沉积等疾病损伤。代谢组学结果显示,金匮肾气丸调节的差异代谢物有132个,富集出63条通路,其中有9条关键代谢通路。结论:金匮肾气丸能抑制腺嘌呤所致肾间质纤维化,其作用机制可能与氨基酸代谢、脂质代谢和能量代谢相关。

2026 年 03 期 v.42 ; 贵州中医药大学学术新苗项目(贵科合学术新苗[2023]-29号); 贵州省科协“新质黔沿”引领项目(编号:2025XZQYXM-02-04); 贵州省科技创新人才团队(黔科合平台人才[2020]5010); 贵州省发改委工程研究中心建设项目(黔发改高技[2020]896号); 贵州省苗医药全省重点实验室(黔科合平台ZSYS[2025]018)
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清肺解毒化痰方调控mTOR/Beclin1/LC3信号轴改善小鼠肺泡巨噬细胞重型炎症模型自噬

贾茗棪;梁瀛今;井芃祯;王海峰;

目的:探究清肺解毒化痰方经mTOR/Beclin1/LC3轴改善体外肺泡巨噬细胞重型炎症模型的自噬机制。方法:用肺炎克雷伯杆菌来源LPS刺激小鼠肺泡巨噬细胞MH-S建立体外重型炎症模型。分为空白对照组、模型对照组、43 g/kg清肺解毒化痰方含药血清20%组、雷帕霉素50 nmol/L组、清肺解毒化痰方含药血清20%+雷帕霉素50 nmol/L组、莫西沙星5μg/mL组。细胞培养12 h后,取上清液及细胞,ELISA法检测MH-S细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-33、干扰素-γ(IFN-γ)含量;CCK-8法检测细胞存活率;qPCR法检测细胞Tnfa、Il1b、Il6 mRNA表达;透射电镜观察MH-S细胞自噬情况;MDC法检测MH-S细胞自噬荧光表达;Western blot法检测MH-S细胞中哺乳动物磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、mTOR、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、肌球蛋白样BCL2结合蛋白(BECLIN1)表达;免疫荧光观察MH-S细胞中p-MTOR、BECLIN1、LC3蛋白荧光表达水平。结果:与空白对照组相比,模型对照组细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-33和IFN-γ含量升高(P<0.01),电镜显示细胞线粒体肿胀,有空泡病变,内嵴断裂或减少,细胞器减少,线粒体附近出现明显自噬体溶酶体结构,MDC染色细胞自噬荧光表达显著增强(P<0.01),p-mTOR/mTOR蛋白比值降低和p-mTOR荧光表达水平下降,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、BECLIN1蛋白上调,LC3、BECLIN1荧光表达水平升高(P<0.05);与模型对照组比较,43 g/kg清肺解毒化痰方20%含药血清组、莫西沙星组细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-33和IFN-γ含量显著降低,自噬体溶酶体数量减少,细胞自噬荧光减弱,p-mTOR/mTOR蛋白表达上调,p-mTOR荧光表达水平升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、BECLIN1蛋白表达上调,LC3、BECLIN1荧光表达水平降低(P<0.01);经雷帕霉素干预后上述炎症因子含量升高(P<0.05),细胞自噬增强(P<0.01),p-mTOR/mTOR蛋白表达下调,p-mTOR荧光表达水平降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、BECLIN1蛋白表达上调,LC3、BECLIN1荧光表达水平升高(P<0.05);与雷帕霉素50 nmol/L组相比,43 g/kg清肺解毒化痰方20%含药血清+雷帕霉素50 nmol/L组上述炎症因子含量降低(P<0.05),细胞自噬减弱(P<0.01),p-mTOR/mTOR蛋白表达上调,p-mTOR荧光表达水平升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、BECLIN1蛋白表达下调,LC3、BECLIN1荧光表达水平降低(P<0.05)。结论:清肺解毒化痰方能减轻重型炎症反应,机制可能与激活mTOR/Beclin1/LC3轴,抑制肺泡巨噬细胞过度自噬有关。

2026 年 03 期 v.42 ; 国家自然科学基金项目(编号:82074411、81774222); 河南省中医药科学研究重大专项(编号:20-21ZYZD04); 河南省高校科技创新团队支持计划(编号:22IRTSTHN029); 河南中医药大学“双一流”创建工程中医学学科项目呼吸疾病中医药防治科技创新团队(编号:HSRP-DFCTCM-T-1); 河南省科技研发计划联合基金(优势学科培育类)项目(编号:232301420084)
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