期刊简介
刊名：中药药理与临床
Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica
主办：中国药理学会
四川省中医药科学院
刊期：月刊
出版地：四川省成都市
语种：中文
ISSN：1001-859X
CN：51-1188/R
创刊时间：1985年
网站访问量
今日访问量: 1,785
加味柴芍六君方抑制IL-8介导的胃癌上皮间质转化的机制研究
蒋敏玲;文辉;何武;杨键;目的:本研究旨在探讨加味柴芍六君方对胃癌上皮间质转化(EMT)过程中白细胞介素-8(IL-8)的调节机制，为胃癌治疗提供新的策略。方法:通过MTT法检测加味柴芍六君方对人胃黏膜细胞(GES-1)的毒性及对胃癌细胞(HCG-27)增殖的影响；通过划痕试验和Transwell侵袭试验评估该方对细胞迁移和侵袭能力的抑制作用；利用TGF-β1 10μg/L诱导EMT模型，并通过慢病毒转染构建IL-8过表达细胞模型；采用ELISA检测癌胚抗原(CEA)、胃泌素(G-17)和IL-8含量，qRT-PCR和Western blot法检测EMT标志物(Ecadherin、Ncadherin、Vimentin、Twist、Snail)及Il8的mRNA和蛋白表达；免疫荧光法观察IL-8蛋白定位。结果:相较于空白对照组，加味柴芍六君方400μg/mL组HCG-27细胞的增殖、迁移和侵袭降低(P<0.01),TGF-β1组、IL-8组，加味柴芍六君方200、400μg/mL组细胞CEA、G-17和IL-8含量显著升高(P<0.01),过表达IL-8组细胞CEA、G-17、IL-8含量显著升高(P<0.01)。与过表达IL-8模型对照组比较，加味柴芍六君方200、400μg/mL组CEA、G-17和IL-8的含量明显降低(P<0.05或P<0.01);加味柴芍六君方400μg/mL+过表达组Ncadherin、Vimentin、Twist、Snail、IL-8蛋白和mRNA表达下调，Ecadherin上调(P<0.05或P<0.01);TGF-β1组细胞Twist mRNA表达上调，Il8、EcadherinmRNA表达下调(P<0.05或P<0.01)。与TGF-β1组比较，加味柴芍六君方+TGF-β1组细胞Vimentin、Twist、SnailmRNA表达下调，Ecadherin、Il8 mRNA表达上调(P<0.05或P<0.01)。免疫荧光结果表明，相较于空白对照组，过表达IL-8组和TGF-β1组的荧光强度较大，而加味柴芍六君方组减弱细胞IL-8的荧光强度。结论:加味柴芍六君方通过调控IL-8及其下游信号通路，显著抑制了胃癌细胞的EMT过程。
大黄甘遂汤调控VEGF/VEGFR2/ERK通路缓解恶性腹水小鼠肿瘤微血管生成的机制研究
何甜甜;唐大轩;张媛;刘亚欧;宁楠;目的:探讨大黄甘遂汤对恶性腹水(malignant ascites, MA)小鼠腹膜肿瘤微血管生成的影响与作用机制。方法:通过腹腔注射H22肝癌细胞悬液建立MA小鼠模型，造模成功后随机分为模型对照组、恩度3×10-3 g/kg组、华蟾素0.5 g/kg组、大黄甘遂汤5、10、20 g/kg组，每组10只，连续给予相应药物7 d。记录小鼠一般状态和死亡情况；测定腹水量；HE染色观察腹膜组织病理学变化；免疫组化和透射电镜检测腹膜微血管密度与超微结构；RT-PCR法检测腹膜组织缺氧诱导因子1α(Hif1α)、血管内皮生长因子(Vegf)、血管内皮细胞生长因子受体2(Vegfr2)、丝裂原活化蛋白激酶1(Mapk1) mRNA表达；Western blot法检测HIF1α、VEGF、VEGFR2、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达。结果:急性毒性实验显示，大黄甘遂汤在≤75 g/kg剂量范围内无小鼠死亡，提示其安全性良好。与正常对照组比较，模型对照组腹水量显著升高(P<0.01),腹膜组织肿瘤细胞增生及新生血管形成明显，微血管密度显著升高(P<0.01),血管结构异常，腹腔组织Hif1α、Vegf、Vegfr2、Mapk1 mRNA和HIF1α、VEGF、VEGFR2、ERK、p-ERK蛋白表达上调，pERK/ERK比值显著增高(P<0.01);与模型对照组比较，大黄甘遂汤各给药组腹水量明显降低(P<0.05),腹膜肿瘤细胞增生、血管新生和微血管密度有降低趋势，腹膜血管结构趋于正常，腹膜组织Hif1α、Vegf、Vegfr2、Mapk1 mRNA表达下调(P<0.05或P<0.01),大黄甘遂汤20 g/kg组HIF1α、VEGF、VEGFR2、ERK、p-ERK蛋白表达下调，pERK/ERK比值降低(P<0.01)。结论:大黄甘遂汤可能通过改善肿瘤缺氧环境中HIF1α的堆积，调节VEGF/VEGFR2/ERK信号通路，缓解肿瘤微血管生成，从而达到治疗MA的目的。
清肺理痰方通过调控JAK/STAT通路改善克雷伯菌所致细菌性肺炎
魏若君;史渊源;丁奇;目的:通过体内外实验探讨清肺理痰方对克雷伯菌诱导的细菌性肺炎的作用机制。方法:将60只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、头孢克肟52 mg/kg组、清肺理痰方2.2、4.5、9 g/kg组，通过气管滴注克雷伯菌悬浮液建立细菌性肺炎的动物模型。造模8 h后，各组灌胃给予相应药物或等体积生理盐水，连续灌胃3 d。检测小鼠肺组织载菌量，计算肺指数；HE染色观察肺组织病理损伤；IHC染色观察肺组织JAK/STAT信号通路蛋白的表达。体外实验：用热灭活的克雷伯菌诱导小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)建立细胞炎症模型。将肺泡巨噬细胞分为空白对照组、模型对照组、清肺理痰方2.5%、5%、10%含药血清组，流式细胞术检测肺泡巨噬细胞吞噬荧光微球能力；qRT-PCR法检测细胞中白细胞介素6(Il6)、Il1b、肿瘤坏死因子(Tnfα)的表达；Western blot法检测细胞JAK/STAT相关通路蛋白的表达。结果:与正常对照组相比，模型对照组小鼠肺组织载菌量显著增加，肺指数显著升高(P<0.01),肺组织炎症细胞浸润增加，肺组织p-JAK1、p-JAK2、p-STAT3、p-STAT6蛋白的表达明显上调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比，清肺理痰各组小鼠肺组织载菌量显著减少，肺指数显著降低(P<0.01),肺组织炎症细胞浸润减少，肺组织p-JAK1、p-JAK2、p-STAT3、p-STAT6蛋白表达明显下调(P<0.05)。与空白对照组相比，模型对照组细胞吞噬率升高，MH-S细胞Il6、Il1β、Tnfα的表达显著上调(P<0.01)、p-JAK1/JAK1、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-STAT6/STAT6的比值明显升高(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比，清肺理痰含药血清各组能明显增强肺泡巨噬细胞吞噬荧光微球的能力(P<0.01);MH-S细胞Il6、Il1β、Tnfα的表达明显下调(P<0.05或P<0.01),p-JAK1/JAK1、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-STAT6/STAT6的比值明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:清肺理痰方通过调控JAK/STAT通路，改善肺炎克雷伯菌所致细菌性肺炎。
