期刊简介
刊名：中药药理与临床
Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica
主办：中国药理学会
四川省中医药科学院
刊期：月刊
出版地：四川省成都市
语种：中文
ISSN：1001-859X
CN：51-1188/R
创刊时间：1985年
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茵陈五苓散调控AMPK/PGC-1α/TFAM通路改善线粒体功能减轻肝细胞性黄疸的机制研究
钟冰莲;王一钦;江稳滔;陈静妃;陈炜聪;老膺荣;贺松其;目的:研究茵陈五苓散对胆红素联合丙磺舒诱导的HepaRG黄疸细胞模型的影响，探讨其退黄作用机制。方法:将HepaRG细胞随机分为正常对照血清组、3.42、6.84、13.68 g/kg茵陈五苓散10%含药血清组、0.10 g/kg熊去氧胆酸10%含药血清组、6.84 g/kg茵陈五苓散含药血清+10μmol/L多索吗啡组、6.84 g/kg茵陈五苓散含药血清+0.095 mmol/L阿卡地新组，CCK-8法检测细胞活力；除正常对照血清组外，均采用胆红素联合丙磺舒构建HepaRG黄疸细胞模型，加入相应药物或含药血清，检测细胞内总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)含量和细胞外直接胆红素(DBIL)含量；检测细胞活性氧(ROS)、线粒体膜电位水平和三磷酸腺苷含量(ATP);实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测腺苷活化蛋白激酶(Ampk)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(Pgc1α)/线粒体转录因子A(Tfam)通路相关靶点mRNA和蛋白表达。结果:与正常对照血清组相比，3.42、6.84、13.68 g/kg茵陈五苓散10%含药血清组及熊去氧胆酸10%含药血清组对细胞活力无明显影响(P>0.05);与正常对照血清组相比，模型对照组细胞TBIL、IBIL含量和ROS水平显著升高(P<0.01),Pgc1α、Tfam的mRNA表达显著下调(P<0.01),p-AMPK、PGC-1α、TFAM蛋白表达明显下调(P<0.05),线粒体膜电位和ATP含量显著降低(P<0.01);与模型对照组相比，3.42、6.84、13.68 g/kg茵陈五苓散10%含药血清组及熊去氧胆酸10%含药血清组细胞内TBIL、IBIL含量显著降低(P<0.01),细胞外DBIL含量显著升高(P<0.01),6.84 g/kg茵陈五苓散10%含药血清组Pgc1α和Tfam的mRNA表达显著上调(P<0.01),p-AMPK、PGC-1α、TFAM蛋白表达明显上调(P<0.05),ROS水平显著降低(P<0.01),线粒体膜电位水平、ATP含量显著升高(P<0.01);与6.84 g/kg茵陈五苓散10%含药血清组相比，6.84 g/kg茵陈五苓散含药血清+10μmol/L多索吗啡组Pgc1α、Tfam的mRNA表达显著下调(P<0.01),p-AMPK、PGC-1α、TFAM蛋白表达明显下调(P<0.05),ROS水平显著升高(P<0.01),线粒体膜电位水平、ATP含量显著降低(P<0.01)。结论:茵陈五苓散通过激活AMPK/PGC-1α/TFAM通路，改善HepaRG黄疸细胞模型中线粒体膜电位，降低ROS水平，提高ATP含量，进而发挥退黄作用。
追毒方调控CD147糖基化介导的有氧糖酵解抑制三阴性乳腺癌增殖及侵袭迁移
刘绍俊;王宗傲;张明慧;龚燕婷;李雨璇;周梁;袁琴;张露蓉;刘敏;目的:研究追毒方对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭迁移的影响，并阐述其分子机制。方法:首先采用MTT细胞毒性试验，Transwell小室侵袭试验和伤口愈合试验观察不同浓度追毒方对三阴性乳腺癌细胞增殖及侵袭迁移能力的影响；通过流式细胞术和乳酸试剂盒评估不同浓度追毒方处理后三阴性乳腺癌细胞糖摄取及乳酸生成、外排水平，以观察其有氧糖酵解水平；Western blot法检测追毒方对三阴性乳腺癌细胞的细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)糖基化及葡萄糖转运蛋白(GLUT1)、单羧酸转运蛋白(MCT4)表达的影响；为了进一步证明追毒方对TNBC细胞有氧糖酵解的调控与CD147糖基化有关，使用糖基转移酶GnT-V激动剂处理细胞，观察其对追毒方抑制效应的逆转作用。结果:与空白对照组相比，追毒方0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2μg/mL组的细胞增殖活性显著降低(P<0.01),24 h IC50为5.00μg/mL,48 h IC50为0.25μg/mL,72 h IC50为0.02μg/mL,追毒方0.4、0.8、1.6μg/mL组和2-DG 2 101μg/mL组的侵袭能力和迁移能力显著降低，CD147糖基化水平显著下降(P<0.01),糖摄取能力显著降低(P<0.01),细胞内和培养上清的乳酸含量显著降低(P<0.01),有氧糖酵解关键跨膜蛋白GLUT1/MCT4的表达显著下调(P<0.01)。视黄酸处理模型中，与空白对照组相比，视黄酸30μg/mL组的糖摄取能力、细胞内及培养上清乳酸含量，CD147糖基化水平降低，GLUT1/MCT4的表达明显上调(P<0.05或P<0.01);与追毒方0.8μg/mL组相比，视黄酸30μg/mL组+追毒方0.8μg/mL组的上述检测指标明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论:追毒方通过调控CD147糖基化抑制GLUT1、MCT4表达，从而下调三阴性乳腺癌有氧糖酵解葡萄糖通量及乳酸生成和外排，最终抑制三阴性乳腺癌增殖及侵袭迁移。
通消阳和颗粒在多柔比星治疗4T1乳腺癌小鼠中的增效减毒作用及其机制研究
王博宇;王嘉萌;李松哲;陈晶;目的:探讨通消阳和颗粒联合多柔比星对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用及机制，并验证其缓解多柔比星治疗4T1乳腺癌荷瘤小鼠心脏毒性的机制，为临床乳腺癌的中西医结合治疗提供理论依据及实验基础。方法:建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型。将造模成功的小鼠分为模型对照组、通消阳和颗粒6.82 g/kg组、多柔比星2.5 mg/kg组、多柔比星+通消阳和颗粒6.82、13.64 g/kg组，每组8只，另选8只作为正常对照组，连续给药28 d。记录一般状况、体质量、肿瘤体积、瘤质量、心脏质量。HE染色观察肿瘤、肺及心脏组织的病理改变；ELISA法检测炎性因子的含量；生化法检测心肌酶的活性；Western blot法检测肿瘤组织中NF-κB、IKKα、E-Cadherin、Vimentin及MMP-9蛋白的表达情况，并检测心肌组织中IKKα、INOS的蛋白表达。结果:与正常对照组比较，模型对照组血清中TNF-α、IL-6、IFN-γ含量明显增加(P<0.05),肿瘤组织多形态，显示出细胞异型性和局部纤维组织增生，肺组织肿瘤浸润和组织破坏，显示致密炎性；与模型对照组比较，通消阳和颗粒6.82 g/kg组、各联合组肿瘤质量显著降低，抑瘤率显著升高(P<0.01),血清中TNF-α、IL-6、IFN-γ的含量、LDH、AST、CK的活力明显降低，肿瘤组织Vimentin、MMP-9、NF-κB及IKKα的蛋白表达明显下调(P<0.05),E-Cadherin的蛋白表达显著上调(P<0.01),肿瘤组织结构异常，伴肿瘤细胞坏死，并伴胞核碎裂，固缩深染，肺组织肿瘤细胞浸润减少，肺转移减少；联合用药组上述指标降低更明显(P<0.05);多柔比星2.5 mg/kg组小鼠的心质量指数明显增加、心肌组织结构明显异常(P<0.01),血清TNF-α、IL-6、IFN-γ含量、LDH、AST、CK的活力明显升高，心肌组织中IKKα及INOS的蛋白表达显著上调(P<0.01),提示心肌损伤；与多柔比星2.5 mg/kg组相比，联合组心质量指数降低，肿瘤质量降低，抑瘤率升高，血清TNF-α、IL-6、IFN-γ、LDH、AST、CK含量或活力降低，肿瘤组织IKKα、NF-κB、Vimentin、MMP-9蛋白表达下调，E-Cadherin蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01),心肌组织IKKα及INOS的蛋白表达下调(P<0.01)。结论:通消阳和颗粒能通过调节NF-κB、INOS、IKKα、Vimentin、MMP-9及E-Cadherin的表达与多柔比星发挥协同作用，抑制4T1小鼠乳腺癌增殖、肺转移及多柔比星诱导的心脏毒性。
