中药药理与临床

基于网络药理学和实验验证探讨补阳还五汤含药血清对高糖损伤血管内皮细胞的影响

目的:基于网络药理学结合实验验证，探讨补阳还五汤含药血清对高糖损伤血管内皮细胞的影响。方法:基于复方网络药理学从TCMSP数据库、化源网、Swisstarget prediction数据库获取补阳还五汤有效化学成分及靶点，通过GeneCards、OMIM、Drugbank数据库收集糖尿病血管并发症相关靶点，运用String数据库构建关键靶点PPI网络图。基于Metascape数据库进行GO和KEGG富集分析。使用Autodock和Pymol软件进行分子对接验证。建立高糖诱导的HUVECS细胞损伤模型，给予5%、10%补阳还五汤含药血清；采用CCK-8法检测HUVECs细胞增殖情况，TBA法测定MDA含量；黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性；Annexin V-FITC/PI双标记法联合Hoechst 33258、JC-1检测细胞凋亡情况；ELISA法检测IL-6、TNF-ɑ炎性因子含量；Western Blot法检测VEGF、p-AKT和AKT蛋白的表达。结果:补阳还五汤治疗糖尿病血管并发症有效成分为69个，潜在靶点306个，涉及的主要有效成分为槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇，关键靶点有血管内皮生长因子(VEGFA),细胞炎性因子TNF、IL6等；生物学过程涉及对激素的反应、细胞对氮化合物的反应及对细胞因子的反应等，细胞组成涉及膜筏、膜侧和受体复合物等；分子功能涉及激酶活性与结合、脂质结合和转录因子结合等过程，其发挥作用机制的通路可能与脂质和动脉粥样硬化，细胞凋亡与衰老，生长激素的合成分泌，胰岛素抵抗，糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路及PI3K-AKT信号通路等相关。基于网络药理学结果佐以实验验证，结果表明与模型对照组比较，18.5 g/kg补阳还五汤10%含药血清组细胞存活率显著增加(P<0.01),18.5 g/kg补阳还五汤含药血清5%、10%组可降低受损内皮细胞MDA含量(P<0.05或P<0.01),显著提高SOD活力(P<0.01),显著抑制细胞凋亡，降低受损内皮细胞IL-6、TNF-ɑ含量(P<0.05或P<0.01),降低VEGF、p-AKT/AKT蛋白表达(P<0.01),改善高糖状态的血管内环境。结论:补阳还五汤能够改善高糖状态的血管内环境，治疗糖尿病血管并发症，机制可能与其保护高糖损伤内皮细胞，促进细胞增殖，抑制细胞凋亡及炎症因子生成，以及下调VEGF和p-AKT/AKT蛋白，调节调控PI3K/AKT信号通路有关。

猪苓多糖的药理作用及机制研究进展

猪苓多糖是从中药猪苓提取的主要活性物质，现代研究表明猪苓多糖具有抗肿瘤、护肝、抗炎和抗纤维化等作用。本研究通过系统收集和整理分析猪苓多糖近20年来的药理作用及机制研究，并加以分析，旨在为未来猪苓多糖的临床应用和机制研究方向提供参考依据。结果表明猪苓多糖的抗肿瘤机制可能与调控细胞周期、调节免疫细胞的功能和影响相关信号通路有关；猪苓多糖可以通过改善肝损伤相关生化指标、抗氧化应激和调节脂质代谢等方面发挥保护肝脏的作用；此外，猪苓多糖还具有降低炎症浸润水平和改善肾、肺等组织纤维化的作用。因此，猪苓多糖对肿瘤、炎症、纤维化等方面的临床防治有着重要意义，其具体作用机制值得进一步深入研究。

生发小鼠模型建立常用脱毛方法的系统比较

目的:系统比较4种脱毛方法对小鼠毛发再生及毛发周期的影响。方法:分别用脱毛膏、硫化钠、松香/石蜡及丙酸睾丸酮建立小鼠脱毛模型,观察小鼠背部毛发脱毛状况及新生毛发生长情况,并通过HE染色切片来综合分析四种脱毛方法对毛囊形态、毛囊数量等影响。结果:脱毛膏法、硫化钠法、松香/石蜡和丙酸睾丸酮法脱毛时间依次为(90±10)s,(150±30)s,(119.36±26.42)s和4周。脱毛外观评定等级为优的比例依次为91.37%,25.00%,50.00%,83.33%。组织病理观察发现该4种方法炎性反应均较轻,毛发再生速度以硫化钠法最快,其次依次为脱毛膏、松香/石蜡、丙酸睾丸酮。结论:松香/石蜡适合于实验周期较长的实验、丙酸睾丸酮法适用于探究雄激素脱发的动物模型、脱毛膏法适用于微生物学及微生态学实验中快速去除被毛暴露皮肤显示血管便于采血及美容脱毛、硫化钠法适用于一次性脱毛。

茯苓多糖对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠体液免疫功能的影响

目的:观察茯苓多糖能否缓解环磷酰胺对小鼠体液免疫功能的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:灌胃正常和环磷酰胺处理小鼠茯苓多糖,生理盐水作为对照,每天1次,于第11天取血,ELISA测血清IgG、IgM。动物在第6天给小鼠腹腔注射20%的兔红细胞0.2ml,分光光度法测血清溶血素,ELISA测血清IL-4,实时定量PCR测脾脏IL-4 mRNA。分离正常和环磷酰胺处理小鼠脾细胞,体外施加茯苓多糖,培养48小时,ELISA测上清IgG、IgM。结果:剂量为100mg/kg的茯苓多糖对正常小鼠和剂量为100及50mg/kg的茯苓多糖对环磷酰胺免疫抑制小鼠血清天然IgG和IgM水平以及溶血素、IL-4、脾脏IL-4 mRNA水平均有提升作用,对环磷酰胺模型小鼠的最小有效剂量为50mg/kg;以100mg/kg的剂量为准进行比较,茯苓多糖对环磷酰胺模型小鼠效果更佳。另外,浓度为50及25μg/ml的茯苓多糖对环磷酰胺处理的小鼠脾细胞产生IgG和IgM也有促进作用,最低有效浓度为25μg/ml。结论:茯苓多糖可以缓解环磷酰胺对小鼠体液免疫功能的抑制作用。

糖肾灌肠方通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路调节糖尿病肾病炎症反应的机制研究

目的:糖尿病肾病(Diabetic kidney disease, DKD)是由高血糖引起的慢性肾脏疾病，炎症反应在DKD中起着关键作用，糖肾灌肠方治疗DKD疗效显著，但作用机制尚不清楚。本研究采用体内实验、临床试验、网络药理学及分子对接等方法对糖肾灌肠方治疗DKD的作用机制进行研究。方法:选取60只C57小鼠，随机分为正常对照组、模型对照组、卡格列净0.013 g/kg组、糖肾灌肠方52 g/kg组。高糖高脂饲养并腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)诱导形成DKD模型。造模成功小鼠给予糖肾灌肠方组灌肠，阳性对照组灌胃给予药物，连续28 d。HE染色观察DKD小鼠肾组织病理形态学改变；通过RT-qPCR、Western blot法检测小鼠肾组织Pi3k、Akt、Nfkb、Tnfa、Il6的mRNA及蛋白表达。将40例符合纳入标准的DKD患者随机分为基础治疗对照组和观察组，各20例，另纳入健康体检者20例为正常对照组。基础治疗对照组应用西医基础治疗，观察组在其基础上联合糖肾灌肠方治疗，两组患者连续用药2 w后，比较两组患者尿微量白蛋白(mALB)、尿蛋白/肌酐(UACR)、巨噬细胞M1水平、TNF-α、IL-6含量；以糖肾灌肠方中药物的名称及“糖尿病肾病”为关键词，搜索相关数据库进行网络药理学及分子对接分析。结果:动物实验显示，与正常对照组比较，HE染色显示肾组织病理损伤明显加重，肾组织中Pi3k、Akt、Nfkb、Tnfa、Il6 mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组相比，糖肾灌肠方52 g/kg组小鼠HE染色显示肾组织病理损伤得到改善，肾组织中Pi3k、Akt、Nfkb、Tnfa、Il6 mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.01)。临床研究显示，经治疗，观察组相较于基础治疗组mALB、UACR含量、巨噬细胞M1水平、TNF-α、IL-6含量下降更为明显(P<0.01)。通过网络药理学研究，糖肾灌肠方筛选出活性成分118个，主要包括芦荟大黄素、水黄皮素等，发现核心靶点TNF-α、IL-6等，GO富集在BP中主要包括炎症反应等；MF主要包括蛋白结构域特异性结合等；CC主要包括细胞外空间等；KEGG富集发现PI3K/AKT等信号通路能在糖肾灌肠方治疗DKD中起关键作用。结论:糖肾灌肠方可能通过调控PI3K/AKT/NF-κB信号通路的表达及TNF-α、IL-6等炎症因子的释放，干预DKD炎症反应发挥治疗作用。

逍遥散抗抑郁作用研究

目的:探讨逍遥散的抗抑郁作用及机制,为其疏肝解郁功效及临床应用提供药理学参考。方法:采用小鼠悬尾实验和小鼠强迫游泳实验观察逍遥散的抗抑郁作用,采用开场实验观察逍遥散对小鼠自主活动的影响;采用5-HTP、DOI致小鼠甩头实验探讨逍遥散抗抑郁作用的机制。结果:逍遥散7.8、15.6g/kg剂量连续给药7d能明显缩短悬尾实验中小鼠的不动时间,15.6g/kg剂量连续给药7d能明显缩短强迫游泳实验中小鼠的不动时间,各有效剂量对小鼠自主活动无影响;逍遥散31.2g/kg剂量连续给药7天能显著减少5-HTP所致小鼠甩头次数,但对DOI诱导的小鼠甩头反应无明显影响;逍遥散31.2g/kg剂量单次给药能明显减少由5-HTP、DOI诱导的小鼠甩头次数;逍遥散15.6g/kg剂量单次给药亦能显著减少由5-HTP诱导的小鼠甩头次数。结论:逍遥散具有抗抑郁作用,作用机制可能与影响脑内5-HT能神经系统有关,特别是5-HT2A受体的功能。

补骨脂药理作用与临床应用研究进展

2020年版《中国药典》(一部)有毒中药毒性成分及毒性特点分析

目的:分析2020年版《中国药典》(一部)中“有毒”中药的毒性成分和毒性特点，为有毒中药临床应用和研究提供参考。方法:查阅2020年版《中国药典》(一部)中有毒药材。通过知网、万方等数据库检索“有毒”中药的毒性成分、毒性特点等信息，进行分析比较。结果:药典中共有83味有毒中药，分别为大毒10味，“有毒”42味，“小毒”31味。除去炮制品共计有38味“有毒”药材。在这38味“有毒”中药中，有8味“有毒”中药的内服与外用功能不同。38味中药的毒性成分各不相同，多为毒苷、生物碱、毒蛋白和金属元素，毒性范围分布于脑、神经、脏腑等。结论:通过对有毒中药的毒性特点和成分分析，总结出有毒中药的功效分布广泛，常见为杀虫、泻下和清热。毒性成分和毒性特点也各不相同，多数有毒中药其有效成分与毒性成分相同，在发挥治疗作用的同时会对机体产生毒性。

华蟾素抗肿瘤作用机制研究进展

华蟾素(Cinobufagin)是来源于中华大蟾蜍(Bufo gargarizans cantor)或黑眶蟾蜍(Bufo melanostietus schneider)的皮经过提取分离得到的提取物，主要包含有蟾蜍二烯羟酸内酯类、吲哚生物碱类、多肽类等多种化学活性成分。随着对其药理作用的深入研究，华蟾素已被证实具有抗肿瘤、抗病毒、强心升压、镇痛、抗炎消肿等作用。对华蟾素抗肿瘤作用的分子机制研究表明，华蟾素可通过诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、调控细胞周期、抑制肿瘤血管生成、调控免疫应答等多种途径发挥抗肿瘤作用。华蟾素目前广泛应用于抗恶性肿瘤治疗，在肝癌、肺癌、胃癌等多种恶性肿瘤中均表现出明显的抑癌效果。本综述着重就近年来国内外关于华蟾素的抗肿瘤作用机制研究进行归纳整理，以期能为华蟾素抗肿瘤治疗提供相应的理论依据。

基于多模态大模型探索智能化医疗在中医舌诊中的临床研究

目的:探索基于人工智能的多模态大模型舌诊，推动智能化医疗在中医舌诊中的临床研究，以期为中医舌诊的标准化、智能化提供新的思路。方法:于2023年3月-2024年3月，随机选取就诊于我院中医、中西医结合科门诊350例患者舌象图像，同时对舌象图像及医生对舌象的初步描述(舌苔、舌质、舌形)进行预处理、特征地提取以及模式识别，依据幽门螺旋杆菌(HP)检测报告的结果，分为训练集和测试集，其中训练集中HP(-)患者200例，HP(+)患者50例，测试集中HP(-)患者50例，HP(+)患者50例。应用阿里达摩院开源的通义千问VL模型，通过人工智能技术分析验证多模态模型在中医舌诊辨识与疾病诊断(HP感染)中的效能。结果:通过该模型有效提高了舌诊结果的客观性和准确性，训练组在决策阈值为0.5时，感染样本的召回率为94.0%,对正常样本的误检率为5.0%。测试集在决策阈值为0.5时，感染样本的召回率为86.0%,对正常样本的误检率为8.0%。结论:本研究开发并测试了一种结合舌象分析与医生初步评估的多模态大型模型，用于识别幽门螺杆菌感染，实验结果显示出该方法有良好的泛化能力和一定的诊断精确度。该模型具有快速学习的优势，能通过分析舌象特征来检测幽门螺杆菌感染，无创且高效。未来可以进一步深入探索智能化医疗在中医舌诊中的应用，以提高中医舌诊的准确性、客观性和效率。同时，未来多模态大模型有望整合更多维度的数据，如患者的脸部、耳朵、手部图像以及脉象等生物特征，连同生活习惯和环境影响等非生物因素，进一步推进中医标准化及精准医疗服务的发展。