- 冯帅华;吴官保;杨届;万文渊;孙湘云;谢玉城;廖建晖;
目的:观察补肾活血汤对兔退变椎间盘组织细胞凋亡及Wnt信号通路的影响，以及调节兔肾小管上皮细胞(rabHK-2)来源外泌体的分泌，对退变椎间盘髓核细胞(NPCs)增殖、凋亡及Wnt信号通路蛋白表达的影响。方法:建立兔椎间盘退变模型，补肾活血汤干预8 w后，采用TUNEL法检测椎间盘组织凋亡阳性细胞率，Western-blot法检测椎间盘组织中Wnt信号通路相关蛋白的表达；5.41 g/kg补肾活血汤灌胃新西兰白兔制备含药血清，以10%补肾活血汤含药血清作用于rabHK-2细胞，采用超高速离心法提取rabHK-2细胞外泌体，透射电镜观察外泌体形态，Western-blot法检测外泌体标志蛋白集群分化因子9(CD9)和集群分化因子63(CD63)的表达；用PKH67荧光试剂盒标记后的外泌体与退变NPCs共孵育，荧光显微镜观察不同浓度外泌体作用于退变NPCs后，退变NPCs对rabHK-2细胞外泌体的摄取情况，CCK-8法检测退变NPCs活力。rabHK-2外泌体与补肾活血汤含药血清单独或联合干预后，应用流式细胞术检测退变NPCs凋亡情况，RT-PCR检测退变NPCs中II型胶原和蛋白多糖的mRNA表达，Western-blot和RT-RCR检测退变NPCs中Wnt信号通路相关蛋白和mRNA的表达情况。结果:补肾活血汤干预后，明显降低了兔退变椎间盘组织细胞凋亡率，并上调了Wnt通路中GSK-3β的蛋白表达，下调了β-catenin的表达(P<0.05);经补肾活血汤含药血清干预后，rabHK-2外泌体CD9、CD63的表达明显上调(P<0.05);不同浓度rabHK-2外泌体干预后，荧光显微镜可见外泌体被退变NPCs所摄取，退变NPCs细胞活力增强(P<0.05);外泌体与补肾活血汤含药血清联合干预后，退变NPCs凋亡率受到明显抑制，细胞中II型胶原和蛋白多糖的mRNA表达明显上调，同时显著上调了GSK-3β的蛋白和mRNA表达，下调了β-catenin的表达，联合补肾活血汤含药血清处理后效果较单独应用外泌体更为明显(P<0.05)。结论:补肾活血汤可能通过抑制Wnt信号通路的活化，减轻兔退变椎间盘组织细胞凋亡，同时能够增加rabHK-2细胞外泌体的分泌，并通过rabHK-2外泌体靶向调控退变NPCs的增殖、凋亡及Wnt信号通路的表达，从而延缓椎间盘退变。
2023年05期 v.39;No.227 2-8页 [查看摘要][在线阅读][下载 299K] [下载次数：731 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：4 ] - 王建美;王冉冉;袁天翊;秦雪梅;杜冠华;
目的:明确瓜蒌薤白汤对低氧性肺动脉高压(Hypoxic Pulmonary Hypertension, HPH)小鼠的预防作用，初步探讨其作用机制。方法:使用TCMSP数据库对瓜蒌和薤白的活性成分及作用靶点进行预测，利用DrugBank、Genecard、OMIM等数据库寻找疾病靶点，构建“中药-化合物-靶点”网络。利用Metascape平台对瓜蒌薤白汤抗HPH的靶点进行基因功能(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。采用UPLC-MS/MS对瓜蒌薤白汤的化学成分进行分析。将C57雄性小鼠随机分为：正常对照组、模型对照组、西地那非0.1 g/kg组和瓜蒌薤白汤1.8 g/kg组，提前3 d预防给药并制备低氧2 w肺动脉高压模型。实验终点时检测小鼠的血流动力学指数，脏器指数和病理学指标，利用Western blot法检测小鼠肺组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、骨形成蛋白2型受体(BMPR2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、肿瘤蛋白P53的蛋白表达。通过上述指标对瓜蒌薤白汤抗低氧性肺动脉高压的作用进行评价和机制研究。结果:TCMSP数据库收集活性成分22种包含：前列腺素、槲皮素、葫芦二烯醇、香叶木素、等，预测靶点172种，其中130种靶点与HPH相关。富集分析结果显示瓜蒌薤白汤抗HPH与细胞增殖、细胞迁移等生物学过程，与转录调节因子和过氧化物酶体等细胞成分，还与氧化还原酶激活和抗氧化活性等分子功能紧密相关，此外，还与肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、Relaxin信号通路和PPAR信号通路等密切相关。与正常对照组比较，模型对照组小鼠的右心室收缩压显著升高(P<0.01),右心室肥厚指数、肺脏指数及肺血管壁厚均明显升高(P<0.05或P<0.01),肺组织中eNOS、BMPR2、PPARγ、P53蛋白表达均明显下调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较，瓜蒌薤白汤1.8 g/kg组能显著降低右心室收缩压(P<0.01),明显降低右心室肥厚指数、肺脏指数及肺血管壁厚(P<0.05或P<0.01),肺组织中eNOS、BMPR2、PPARγ、P53蛋白表达均明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论:瓜蒌薤白汤可能是通过激活PPAR信号通路发挥预防HPH的作用。
2023年05期 v.39;No.227 8-15页 [查看摘要][在线阅读][下载 552K] [下载次数：703 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：14 ] |[阅读次数：4 ] - 毛茜;王子强;王川;刘继平;慕雅楠;卫昊;
目的:基于网络药理学及动物实验探讨双石通淋胶囊治疗良性前列腺增生(BPH)的作用机制。方法:通过TCMSP、SymMap和ETCM数据库筛选双石通淋胶囊的化学成分及靶点；利用GeneCards、DisGeNET和DrugBank数据库检索BPH疾病靶点；用STRING数据库构建蛋白互作网络；对关键靶点进行GO和KEGG富集分析；利用Cytoscape 3.7.2软件构建“双石通淋胶囊-活性成分-靶点-通路”图。分子对接预测核心成分与靶点的结合能力。采用去势联合皮下注射丙酸睾酮建立大鼠前列腺增生模型，造模同时进行灌胃干预，连续28 d,末次给药24 h后，比较各组大鼠体质量、前列腺湿质量及指数；HE染色和Masson染色观察前列腺组织病理变化和胶原沉积情况；Western blot法检测大鼠前列腺组织中EGFR、VEGFA、p-P38、p-AKT蛋白的表达。结果:双石通淋胶囊筛选出193种活性成分，包括槲皮素、木犀草素、汉黄芩素、黄芩素、薯蓣皂素、等核心成分，对应靶点422个，与994个疾病靶点取交集后得到100个共同靶点，核心靶点包括AKT1、STAT3、EGFR、CASP3、VEGFA、等；GO富集分析发现生物途径主要包括酶结合、转录因子结合、蛋白激酶结合、等；细胞组分主要包括大分子络合物、转录因子复合物、核染质、等；分子功能包括酶结合、序列特异性DNA结合、转录因子结合、等；KEGG富集分析发现MAPK信号通路、PI3K/AKT信号通路等可能在双石通淋胶囊治疗良性前列腺增生中起关键作用。分子对接结果显示，汉黄芩素与VEGFA结合能力最强。HE和Masson染色显示，与假手术对照组相比，模型对照组大鼠前列腺组织增生及胶原沉积明显；与模型对照组相比，双石通淋胶囊2.5 g/kg组大鼠前列腺湿质量和指数明显降低(P<0.05);给药各组大鼠前列腺中EGFR、VEGFA、p-AKT、p-P38蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01),给药各组的前列腺增生程度及胶原沉积明显减轻。结论:双石通淋胶囊通过多靶点、多通路治疗BPH,其作用机制可能与调控EGFR、VEGFA、p-P38、p-AKT的表达有关。
2023年05期 v.39;No.227 15-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 669K] [下载次数：529 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：4 ] - 刘桂敏;汤轶波;于淑俊;佟科锦;王帅强;沈真如;刘丹;刘柘君;唐田;刘振权;
目的:基于网络药理学及分子对接技术加以药效实验探究当归贝母苦参丸加味治疗慢性前列腺炎(CP)的作用机制。方法:通过中药系统药理分析平台(TCMSP)、中医药综合数据库(TCMID)和文献挖掘获得当归贝母苦参丸加味活性成分；运用SwissTargetPrediction数据库进行活性成分靶点预测，同时对TCMSP数据库成分已有靶点加以补充；运用在线孟德尔人类遗传数据库(OMIM)、GeneCards数据库、美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库收集CP相关靶点；运用Cytoscape软件构建中药-活性成分-靶点-通路网络图；运用STRING数据库进行生信分析，构建靶点蛋白-靶点蛋白互作(PPI)网络图，运用CytoNCA筛选核心靶点，并用Cytoscape进行可视化网络展示；运用DAVID数据库对核心靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析；Autodock-Tools、Vina对当归贝母苦参丸加味活性成分和关键靶点蛋白进行分子对接；通过Western Blot法验证活性成分与关键靶蛋白的相互作用。结果:筛选出当归贝母苦参丸加味活性成分67个，包括槲皮素、β-谷甾醇、天竺葵素、等重要成分，对应靶点411个，疾病靶点806个，药物与疾病的共有靶点155个；筛选出的核心靶点包括核转录因子κB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)、丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)、MAPK14、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)等39个关键蛋白；GO富集分析得到凋亡过程的负调控、一氧化氮生物合成过程的正调控、MAP激酶活性的正调控、MAPK级联、核内NF-κB输入等369个生物过程，胞浆、细胞质、线粒体、蛋白质复合物等30个细胞组分，蛋白质结合、酶结合、一氧化氮合酶调节活性、MAP激酶活性、NF-κB结合等57个分子功能；KEGG富集分析得到TNF信号通路、PI3K-AKT信号通路、MAPK信号通路、雌激素信号通路、P53信号通路、NF-κB信号通路、等93条；分子对接显示β-谷甾醇与丝裂原活化蛋白激酶P38(P38MAPK)蛋白结合能最高，而应激活化蛋白激酶(JNK)蛋白、NF-κB蛋白与其他分子均有较高的结合能；动物实验结果表明，与正常对照组比较，模型对照组大鼠体质量与前列腺湿质量显著下降，病理状况显著异常，卵磷脂小体视野面积占比显著下降，白细胞个数明显升高，血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高，p-P38MAPK、p-JNK、p-NF-κB、P38MAPK、JNK蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较，当归贝母苦参丸加味8.1、16.2 g/kg组大鼠体质量以及前列腺湿质量明显升高(P<0.05或P<0.01),当归贝母苦参丸加味16.2 g/kg组病理状况显著改善(P<0.01),白细胞个数显著降低(P<0.01),卵磷脂小体视野面积占比显著升高(P<0.01),当归贝母苦参丸加味8.1、16.2 g/kg组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.01),前列腺组织p-P38MAPK、p-JNK、p-NF-κB蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:当归贝母苦参丸加味可能通过调控MAPK信号通路、NF-κB信号通路相关蛋白的表达从而抑制炎性因子释放，进而改善大鼠前列腺炎症水平。
2023年05期 v.39;No.227 22-31页 [查看摘要][在线阅读][下载 1357K] [下载次数：1278 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：4 ] - 尤耀东;骆春梅;申毅锋;朱坤;周静;黄晓朋;常德贵;
目的:采用网络药理学研究芪蓝方治疗前列腺癌的生物学物质基础与药效机制。方法:借助TCMSP、GeneCards等数据库及相关文献构建芪蓝方治疗前列腺癌的“药物-疾病-靶点”网络，利用STRING及Cytoscape插件构建上述药物治疗前列腺癌的蛋白-蛋白相互作用网络，同时对关键靶点进行GO功能富集分析以及KEGG信号通路富集分析，并以细胞实验进一步验证网络药理学所得结论。结果:芪蓝方治疗前列腺癌的“药物-疾病-靶点”网络共涉及423个生物活性成分，筛选后获得227个靶基因，783个前列腺癌靶点，二者共同靶点89个；芪蓝方中核心活性分子为槲皮素、木犀草素、山柰酚、薯蓣皂苷素、刺芒柄花素、异黄杞苷素。关键靶点为PTGS2、PGR、AR、PPARG、ESR1、RELA;共同靶点的PPI网络中节点度排名前五位的为TP53、ESR1、MYC、AKT1、CCND1。GO富集分析提示芪蓝方治疗前列腺癌的生物学过程及功能集中在细胞增殖、对氧化应激的反应、对活性氧的反应、对类固醇激素的反应、凋亡信号通路的调控、等。KEGG通路富集分析提示芪蓝方治疗前列腺癌主要涉及PI3K-AKT信号通路、细胞凋亡、前列腺癌相关信号通路、内分泌抵抗、lL-17信号通路、化学致癌受体激活、等通路。细胞实验结果显示，与空白对照组相比，35 g/kg芪蓝方含药血清组PC-3凋亡率明显升高，细胞内H_2O_2、MDA水平升高，BAX、CASP9、P53蛋白明显上调(P<0.05),同时PC-3增殖、侵袭、迁移能力明显降低，细胞内SOD水平、总抗氧化能力明显降低，Ar、Psa mRNA表达下调，BCL-2、p-PI3Kp85、p-AKT、CCND1蛋白明显下调(P<0.05)。结论:芪蓝方治疗前列腺癌的作用靶点和药效机制，可能与其调控细胞增殖凋亡、氧化应激和类固醇反应的生物学过程及PI3K/AKT信号通路相关。
2023年05期 v.39;No.227 32-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 1391K] [下载次数：801 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：4 ] - 周均锐;罗霞;余梦瑶;江南;向生霞;李芳;谢刚;
目的:探讨四仙颗粒及其拆方对化疗致小鼠血小板减少的改善作用及其作用机制。方法:尾静脉注射卡铂建立化疗致血小板减少小鼠模型，以四仙颗粒及其拆方(温肾健脾方、活血生血方)干预14 d。采集小鼠眼眶静脉血，动物血细胞分析仪测定血小板数量；流式细胞法检测小鼠股骨骨髓中CD34~+和CD41a~+CD61~+细胞百分率；HE染色观察小鼠股骨骨髓中巨核细胞数量；RT-qPCR法检测小鼠骨髓分化相关基因的表达。结果:与正常对照组比较，模型对照组小鼠血小板数量显著降低(P<0.01),小鼠骨髓细胞中CD34~+细胞比例显著减少(P<0.01),骨髓中巨核细胞数量明显减少(P<0.05),骨髓细胞中CD41a~+CD61~+细胞比例显著减少，骨髓细胞中血小板生成素受体(Mpl)、血小板生成素(Tpo) mRNA的表达明显下调(P<0.05或P<0.01),表明造模成功；与模型对照组比较，各给药组血小板数量明显升高(P<0.05或P<0.01),四仙方组CD34~+细胞百分率明显升高(P<0.05),各给药组CD41a~+CD61~+细胞百分率均呈现升高趋势，各给药组骨髓中巨核细胞数量均呈现升高趋势，全方作用优于拆方，各给药组Tpo、Mpl mRNA的表达明显上调(P<0.05或P<0.01),温肾健脾组作用优于其他组，各给药组Gata1 mRNA的表达明显下调(P<0.05或P<0.01),四仙方组和重组人白介素-11(rhIL-11)组均能下调Gata2 mRNA的表达(P<0.01)。结论:四仙颗粒及其拆方均能促进造血干/祖细胞和巨核细胞的增殖、成熟及血小板的生成，2个拆方组作用效果各有侧重，其作用机制可能与调控TPO/MPL信号通路有关。
2023年05期 v.39;No.227 41-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 467K] [下载次数：487 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：4 ] - 陈晗;周静;许洪玲;张磊;
目的:研究黄连乌梅提取物对脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠炎症和肠道菌群的影响及作用机制。方法:将50只雄性C57BL/6小鼠根据体质量随机分为正常对照组、模型对照组及黄连乌梅提取物8.5、17 g生药/kg组和醋酸泼尼松50 mg/kg组，各组动物灌胃给药14 d后腹腔注射LPS 5 mg/kg建立炎症小鼠模型，6 h后采集样本。采用HE染色法观察小鼠脾脏、肝脏组织形态结构；ELISA法检测小鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量，脾脏组织中的MDA含量和SOD活力；Western blot法测定脾脏组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、核因子κB p65(NF-κB p65)和Toll样受体4 (TLR4)的蛋白表达；采用高通量测序法检测小鼠肠道菌群变化。结果:与正常对照组比较，模型对照组小鼠脾、肝脏组织均可见一定程度病理改变，血清中促炎细胞因子水平、脾脏组织中MDA含量明显升高，HMGB1、TLR4蛋白表达显著上调，脾脏组织中总SOD活力明显降低(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较，黄连乌梅提取物8.5、17 g生药/kg组的脾、肝脏组织损伤明显减轻，小鼠血清中IL-1β、TNF-α和IL-6的含量显著降低(P<0.01),脾脏组织中总SOD活力显著增强，MDA含量显著降低(P<0.01),黄连乌梅物8.5 g生药/kg组小鼠脾脏组织中NF-κB p65、HMGB1和TLR4蛋白表达显著上调(P<0.01);16S rDNA扩增子测序(16S rDNA Amplicon Sequencing)结果显示，黄连乌梅提取物8.5 g生药/kg组小鼠盲肠厚壁菌门与拟杆菌门的比率升高，乳酸杆菌属相对丰度升高，拟杆菌属和幽门螺杆菌属相对丰度明显降低(P<0.05或P<0.01),无论门水平或是属水平，黄连乌梅提取物8.5 g生药/kg组的肠道菌群总体水平与其他组相比最接近正常对照组。结论:黄连乌梅提取物能够抑制HMGB1、TLR4蛋白表达进而调控机体免疫，对小鼠因LPS所致炎症受损脏器内促炎因子细胞分泌具有抑制作用，同时保护受损脏器，其抗炎机制可能与抑制氧化应激反应和调控肠道菌群丰度有关。
2023年05期 v.39;No.227 46-51页 [查看摘要][在线阅读][下载 979K] [下载次数：945 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：4 ] - 罗波;赵建棋;李娇;黄凌恺;罗前东;唐灿;
目的:运用Caco-2细胞模型研究白术提取物对人参皂苷Rg1肠吸收的影响。方法:建立Caco-2细胞模型及使用高效液相色谱测定人参皂苷Rg1含量方法，考察在最适细胞生长浓度下，白术提取物对人参皂苷Rg1表观渗透系数(Papp)和转运量的影响。结果:本研究成功构建了Caco-2细胞模型及人参皂苷Rg1的高效液相色谱含量测定方法，研究显示，与正常对照组相比，模型对照组中200μg/mL白术提取物可显著促进400μg/mL人参皂苷Rg1在肠道的吸收，Papp增加超过3倍(P<0.01)。结论:提示白术提取物对人参皂苷Rg1肠吸收有较好的促进作用。
2023年05期 v.39;No.227 51-55页 [查看摘要][在线阅读][下载 248K] [下载次数：1206 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：4 ]
- 邓君竹;吴建明;易泰安;李跃跃;胡海洋;邹文俊;
目的:研究杨梅苷对K562细胞向巨核细胞分化和X射线致血小板减少症小鼠的治疗作用及分子机制。方法:杨梅苷干预K562细胞后，利用镜下拍照观察细胞形态变化；吉姆萨染色观察多倍体形成情况；鬼笔环肽染色观察纤维型肌动蛋白的表达；流式细胞术检测巨核细胞表面抗原CD41~+/CD42b~+的表达，从而验证杨梅苷促进巨核细胞分化的活性。采用4Gy X射线辐射昆明小鼠建立血小板减少症模型，将造模后的小鼠随机分为模型对照组、杨梅苷5、10 mg/kg组、阳性药rhTPO 3 000 U/kg组，给药第4、7、11 d时使用血细胞分析仪检测小鼠外周血象。给药第11 d, HE染色观察小鼠骨髓巨核细胞数目；流式细胞术检测脾脏细胞CD41~+/CD61~+表达水平。杨梅苷干预K562细胞后，蛋白印迹法检测MEK和ERK蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果:与空白对照组相比，杨梅苷10、20、40μmol/L组可显著促进K562细胞体积增大，多倍体细胞数目增多，纤维型肌动蛋白荧光强度增强，CD41~+/CD42b~+表达升高(P<0.01);与模型对照组相比，杨梅苷5、10 mg/kg组可显著加速X射线诱导的血小板减少症小鼠血小板浓度的恢复(P<0.05或P<0.01),增强骨髓有核细胞数以及脾细胞CD41~+/CD61~+的表达(P<0.01);杨梅苷10、20、40μmol/L组明显上调K562细胞MEK和ERK的磷酸化蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:杨梅苷可通过激活MEK/ERK信号通路促进巨核细胞分化，促进X射线诱导的血小板减少症小鼠的血小板生成。
2023年05期 v.39;No.227 56-62页 [查看摘要][在线阅读][下载 1114K] [下载次数：312 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：4 ] - 赖克道;胡筱希;陆国寿;黄建猷;黄周锋;袁健童;
目的:对鸡血藤总黄酮提取物中的黄酮类成分进行辨识和鉴定，并对其治疗骨质疏松的靶点进行预测，观察其对核因子κB受体活化因子配体(sRANKL)诱导RAW264.7向破骨细胞分化的影响，并对破骨细胞分化产生影响的作用成分及作用机制进行探讨。方法:采用液相色谱-离子阱-静电轨道阱杂交质谱(HPLC-LTQ/Orbitrap MS)法采集数据后，对各色谱峰的质谱图高分辨一级和二级质谱数据进行解析，与文献数据库进行对比，对各色谱峰进行结构推测和确认。运用Swiss Target Prediction、GeneCards、String平台预测鸡血藤总黄酮18个成分与骨质疏松相关的潜在靶点，在DAVID 6.8平台进行基因功能富集和KEGG通路富集分析，Cytoscape软件构建“成分-靶点”网络。体外培养RAW264.7细胞，sRANKL诱导破骨细胞分化，鸡血藤总黄酮干预后，通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性检测盒TRAP染色法评价破骨细胞形成和分化能力，Western blot法检测雌激素受体(Estrogen receptor, ESR)相关蛋白的表达。结果:从鸡血藤总黄酮提取物中共鉴定了18个黄酮类化合物(芒柄花素、染料木素及美迪紫檀素等),网络药理学预测共得到鸡血藤黄酮化合物治疗骨质疏松的潜在共同作用靶点33个，筛选出16条与骨质疏松相关的信号通路。GO分析和KEGG分析显示关键靶点涉及催乳素(Prolactin)、内分泌(Endocrine)、雌激素(Estrogen)、缝隙连接(Gap junction)、酪氨酸激酶受体(ErbB)、等信号通路，生物过程主要涉及以DNA为模板的转录调控、蛋白质自磷酸化、血管收缩的正向调节、等；分子功能涉及蛋白酪氨酸激酶活性、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性及类固醇结合等；细胞组分涉及细胞膜上的膜筏、原生质膜、神经元末端、等。实验验证结果显示：与正常对照组相比，sRANKL 50 ng/mL组耐酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)活性明显升高，ESR1、ESR2蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01),与sRANKL 50 ng/mL组比较，鸡血藤总黄酮50μg/mL组TRAP活性明显降低(P<0.05);TRAP阳性细胞随着鸡血藤总黄酮组浓度的增大逐渐减少；鸡血藤总黄酮25、 50μg/mL组ESR1、ESR2蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论:鸡血藤总黄酮中多种黄酮成分具有调节雌激素的作用，其通过与雌激素受体结合，抑制sRANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化，从而起到预防骨质疏松的作用。
2023年05期 v.39;No.227 62-69页 [查看摘要][在线阅读][下载 733K] [下载次数：1173 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：25 ] |[阅读次数：4 ] - 谢林碧;郑文浩;赵欢;白筱璐;胡竟一;雷玲;余悦;吴瑕;李东晓;
目的:评价马甲子提取物对大鼠实验性炎性肠病(Inflammatory bowel disease, IBD)的干预作用，探讨其作用机制。方法:以2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)为致炎剂复制大鼠IBD模型，灌胃给予马甲子，观察疾病活动指数(DAI)、结肠粘膜损伤指数(CMDI)、结肠长度、结肠组织病理、血清炎症相关因子白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子(Tumour necrosis factor-α,TNF-α)、环氧合酶2(Cyclooxygenase 2,COX2)等指标；采用转录组测序(RNA-Seq)筛选差异基因，免疫蛋白印迹法(Western blot, WB)检测相关基因的蛋白表达。结果:马甲子820 mg/kg组可减轻IBD大鼠结肠组织炎症，显著增加结肠长度(P<0.01),明显降低血清中IL-6、IL-1β、TNF-α、COX2含量(P<0.05或P<0.01)。马甲子820 mg/kg组共筛选出514个差异基因(|lg2 Fold change|≥1.5,P<0.01),主要涉及IL-17信号通路(IL-17 signal pathway)、cAMP信号通路(cAMP signal pathway)等；其中与IBD密切相关的IL-17信号通路中，与模型对照组比较，马甲子820 mg/kg组可下调CCATT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding proteinβ,C/Ebpb)、丝裂原活化蛋白激酶家族(Mitogen active protein kinases,Mapks)以及下游炎症因子IL-1β、C-C趋化因子7(C-C motif chemokine 7,Ccl7)、S100钙结合蛋白A8(S100 Calcium Binding Protein A8,S100a8)、Cox2基因的表达；WB结果显示马甲子820 mg/kg组干预后IL-17信号通路中糖原合成酶激酶3β(Glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)蛋白表达上调(P<0.01),C/EBPβ蛋白表达下调(P<0.01)。结论:马甲子能明显改善IBD大鼠的结肠炎性损伤，其作用机制可能与上调GSK3β蛋白表达，下调C/EBPβ的表达，从而影响下游炎症因子COX2、IL-6、IL-1β、TNF-α、CCL7、S100A8水平有关。
2023年05期 v.39;No.227 69-75页 [查看摘要][在线阅读][下载 696K] [下载次数：473 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：4 ] - 刘静;苏洁;吴雯琰;金小虎;郑佳亿;吕圭源;蒋立勤;
目的:观察白术不同提取物(多糖和挥发油)对高糖高脂饲料喂养致非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型小鼠的作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照依折麦布片1 mg/kg组、白术多糖提取物150、300、600 mg/kg组，白术挥发油提取物6.3、12.5、25 mg/kg组，除正常对照组给予普通饲料外，其余各组每天给予高糖高脂饲料喂养，并同时灌胃给药，连续6 w。观察小鼠体质量、口服糖耐量(OGTT);测定血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、葡萄糖(GLU)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量或活力；解剖取肝脏，测定肝脏中TC、乳酸脱氢酶(LDH)含量；测定肝脏免疫炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量；称肝脏湿质量；HE染色观察肝脏组织形态学变化；油红O染色观察肝脏脂质沉积状况；免疫组化染色观察肝脏Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、髓样分化因子88(MyD88)、TNF-α、IL-6蛋白阳性表达情况。结果:与正常对照组比较，模型对照组小鼠体质量、ALT活力、血脂代谢指标及肝脏LDH、肝脏湿质量、OGTT显著升高，肝脏脂质沉积、炎性浸润，肝脏TC、LDH、IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高(P<0.05或P<0.01),肝脏TLR4、MyD88、NF-κB、IL-6、TNF-α蛋白阳性表达明显升高(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较，白术不同提取物组小鼠体质量、OGTT、肝脏湿重、血清TC、GLU、ALT含量或活力明显降低，肝脏TC、LDH、IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显降低，肝脏TLR4、MyD88、NF-κB、IL-6、TNF-α蛋白阳性表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:白术不同提取物(多糖和挥发油)均具有改善NAFLD的作用。
2023年05期 v.39;No.227 75-82页 [查看摘要][在线阅读][下载 1083K] [下载次数：1749 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：55 ] |[阅读次数：4 ] - 孙雪;张礼林;王成维;李金虎;叶洵;宋林江;吴纯洁;
目的:以热水浴结合脂多糖(LPS)诱导的SD幼鼠高热惊厥(Febrile seizure, FS)模型探究羚羊角抗高热惊厥的作用。方法:72只21 d龄雄性SD大鼠，随机分为正常对照组、模型对照组、羚羊角1、1.5、3 g/kg组和地西泮6.7 mg/kg组。各组大鼠预先灌胃相应药物3 d,末次灌胃前1 h腹腔注射LPS。灌胃后1.5 h,造模幼鼠用热水浴(46±0.5)℃诱导惊厥。观察并记录惊厥延迟时间、惊厥评分、惊厥死亡率；尼氏染色观察大鼠脑组织病变情况；ELISA法检测大鼠脑组织中神经递质谷氨酸(Glu)、去甲肾上腺素(NE)、γ-氨基丁酸(GABA)含量、白介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-18含量及大鼠海马中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白含量；RT-PCR法检测大鼠海马组织中Caspase-1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nlrp3)、凋亡相关微粒蛋白(Asc)、Il1b、Il18 mRNA表达；Western blot法检测海马组织中细胞核与细胞质中核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果:与正常对照组相比，模型对照组惊厥评级、死亡率明显增加，惊厥延迟时间明显降低(P<0.05或P<0.01),脑组织中Glu、IL-1β、IL-18、IL-6和TNF-α含量明显增加，NE和GABA含量明显降低(P<0.05或P<0.01),脑组织中Caspase-1蛋白含量显著增加，海马中Caspase-1、Nlrp3、Asc、Il1β及Il18 mRNA表达显著上调，海马组织核NF-κB表达显著上调(P<0.01),胞NF-κB表达下调(P<0.01);与模型对照组相比，羚羊角3 g/kg组能显著延长FS大鼠惊厥延迟时间，降低惊厥评分和惊厥死亡率(P<0.01),且对高热惊厥造成的神经病理损伤均有明显改善；羚羊角各组脑组织中Glu、GABA含量显著降低，NE含量显著升高(P<0.01); IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-18含量明显降低(P<0.05),海马Caspase-1、Nlrp3、Asc、Il1b及Il18 mRNA表达均明显下调(P<0.01或P<0.05)。羚羊角3 g/kg组明显下调FS幼鼠海马组织中NF-κB蛋白的核转位并降低脑中Caspase-1蛋白含量(P<0.01)。结论:羚羊角对高热惊厥幼鼠具有较好的治疗作用。能够显著降低惊厥死亡率，对惊厥引起的脑组织病理损伤具有保护作用，可能是通过调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路进而调节神经递质和抑制神经炎症等机制发挥抗惊厥作用。
2023年05期 v.39;No.227 82-88页 [查看摘要][在线阅读][下载 563K] [下载次数：1057 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：4 ] - 廖富娟;刘宇瑶;何晗;陈林;陈鸿平;王福;胡媛;刘友平;
目的:探讨不同直径范围半夏主要成分含量与毒性、刺激性差异，确定半夏适宜的入药直径范围以更好利用资源。方法:共设3个试验组，符合《中国药典》2020版(一部)半夏项下直径范围0.7 cm～1.6 cm者设为标准组，直径范围在0.4 cm～0.7 cm者为小于标准组，直径范围在1.6 cm～2.0 cm者为大于标准组。采用紫外-可见分光光度法测定半夏中总黄酮、总生物碱、淀粉含量，高效液相色谱法测定草酸钙含量；应用UPLC-ESI-MS/MS广泛靶向代谢组学技术，通过主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)及火山图(Volcano plot)对组间差异代谢物分析，对差异代谢物进行京都基因与基因百科全书(KEGG)分类与富集分析；采用MTT比色法检测半夏对AML12肝细胞活力变化；采用兔眼结膜刺激考察不同直径半夏的刺激性毒性。结果:与标准组比较，小于标准组的总黄酮、总生物碱和淀粉含量均有明显变化(P<0.05),大于标准组的总黄酮和淀粉含量有明显变化(P<0.05),各组草酸钙含量无显著差异。PCA与OPLS-DA结果表明不同组半夏次生代谢物存在明显差异；火山图结果显示，与标准组比较，小于标准组有99个代谢物显著上调，1个代谢物显著下调；大于标准组有39个代谢物显著上调，18个代谢物显著下调；主要为黄酮及黄酮醇类代谢物；KEGG分析结果表明标准组在类黄酮生物合成、黄酮和黄酮醇生物合成通路发生明显富集。MTT结果显示3组半夏对AML12肝细胞的存活率随给药浓度升高先上升后下降；兔眼结膜刺激试验表明在给药4 h后，小于标准组的刺激性毒性高于标准组和大于标准组。结论:直径不足0.4 cm～0.7 cm的半夏应不作药用，直径1.6 cm～2.0 cm的半夏可作为药用，建议将相关标准中规定的直径修改为0.7 cm～2.0 cm。
2023年05期 v.39;No.227 88-95页 [查看摘要][在线阅读][下载 549K] [下载次数：1016 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：5 ] - 徐静;李晓亮;高宁;梁华;王秋红;匡海学;
目的:探讨商陆水煎液及不同组分对大鼠上焦水饮内停模型药效学研究，寻找商陆对上焦水饮内停模型作用的药效物质基础。方法:采用复合造模因素(大鼠腹部皮下注射异丙肾上腺素+气管插管+寒冷刺激)建立上焦水饮内停模型，模型建立后开始给予商陆水煎液0.81 g/kg、多糖组分0.31 g/kg、皂苷组分0.22 g/kg、酚酸组分0.17 g/kg、鞣质组分0.09 g/kg,连续灌胃给药14 d。试验结束后检测大鼠血清白蛋白(ALB)、肌酸激酶(CK)含量，肺干湿比，肺泡灌洗液中蛋白含量，心、肺脏指数，观察心、肺组织病理切片，综合评价商陆水煎液及不同组分对上焦水饮内停模型大鼠利水功效。结果:与正常对照组比较，模型对照组血清ALB含量显著降低(P<0.01),肺泡灌洗液中蛋白浓度、肺干湿比、CK活力以及心脏、肺脏指数明显升高(P<0.05或P<0.01),心、肺组织受损较严重，上焦水饮内停模型建立成功；与模型对照组比较，商陆水煎液0.81 g/kg组可明显升高血清ALB(P<0.05),明显降低CK活力、肺泡灌洗液中蛋白含量、心脏指数、肺干湿比(P<0.05或P<0.01);多糖组分0.31 g/kg组可明显升高血清ALB(P<0.05),明显降低CK活力、心脏指数、肺脏指数、肺干湿比(P<0.05或P<0.01);皂苷组分0.22 g/kg组明显升高血清ALB含量(P<0.05),明显降低CK活力(P<0.05);商陆水煎液0.81 g/kg组、多糖组分0.31 g/kg组对上焦水饮内停大鼠心、肺病理状况有明显改善作用。结论:商陆水煎液可改善上焦水饮内停模型大鼠的心肺损伤。多糖组分和皂苷组分对上焦水饮内停模型大鼠具有不同程度的治疗作用，其中多糖组分治疗作用明显。
2023年05期 v.39;No.227 96-100页 [查看摘要][在线阅读][下载 418K] [下载次数：372 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：4 ]